Методичка для студентов

Министерство здравоохранения Амурской области

Государственное автономное учреждение амурской области профессиональная образовательная организация
«амурский медицинский колледж»




методические рекомендации
для самостоятельной работы студентов на практическом занятии

ПМ.02 Проведение лабораторных гематологических исследований
МДК 02.01. Теория и практика лабораторных гематологических исследований

специальность 31.02.03 Лабораторная диагностика
квалификация Медицинский технолог




Занятие №4
Тема: Подсчет эритроцитов в камере Горяева






















Благовещенск -2015
Рассмотрено
на заседании ЦМК спец. дисциплин
«Лабораторная диагностика»
Протокол №________
«_____»___________________2015 г.
Председатель ЦМК
Маятникова Н.И. _______________



Утверждаю

Зам. директора по НМР
М.А. Сидоренко___________________
«_____»____________________2015 г.

Методические рекомендации для самостоятельной работы студентов на практическом занятии разработаны в соответствии с Рабочей программой профессионального модуля ПМ.02 Проведение лабораторных гематологических исследований междисциплинарного курса МДК 02.01. Теория и практика лабораторных гематологических исследований и требованиям ФГОС по специальности 31.02.03 Лабораторная диагностика квалификации «Медицинский технолог».


Организация-разработчик: ГАУ АО ПОО «Амурский медицинский колледж».

Разработчик:
Стринадко Татьяна Валерьевна, кандидат биологических наук, преподаватель ГАУ АО ПОО «Амурский медицинский колледж» I квалификационной категории.

Методические рекомендации для самостоятельной работы студентов на практическом занятии рассмотрены на заседании ЦМК специальных дисциплин, и рекомендованы к использованию при обучении студентов медицинского колледжа.



Список использованной литературы.

Методы клинических лабораторных исследований / под ред. проф. В.С. Камышникова. – 4-е изд. – М. : МЕДпресс-информ, 2011. – 752 с. :ил. (Стр. 342-344).
Кишкун А.А. «Руководство по лабораторным методам диагностики», Москва, «ГЕОТАР –МЕДИА, 2007г.
[ Cкачайте файл, чтобы посмотреть ссылку ]
[ Cкачайте файл, чтобы посмотреть ссылку ]





Занятие № 4.
Тема: Подсчет эритроцитов в камере Горяева.

Цель: Научиться считать эритроциты в камере Горяева

Задачи.
Студенты должны знать:
Клинико-диагностическое значение подсчета эритроцитов.
Границы референтных показателей.
Факторы, влияющие на результат исследования.
Устройство камеры Горяева.

Студенты должны уметь:
Готовить рабочее место лаборанта для подсчета эритроцитов;
Готовить оборудование, посуду и реактивы для подсчета эритроцитов;
производить взятие крови для подсчета эритроцитов;
Заправлять камеру Горяева;
Производить подсчет эритроцитов в камере Горяева;
Производить расчет эритроцитов;
Интерпретировать результаты с позиции «норма» - «патология».
Оснащение занятия:
Наглядные пособия:
печатные пособия (методическая разработка практического занятия для преподавателя, методическая разработка практического занятия для студентов);
проекционный материал (презентация).
Технические средства обучения:
Мультимедиа
3. Специальное оборудование:
Лабораторная посуда
Камера Горяева
Реактивы:
Физиологический раствор
Спирт 70%

Место проведения занятия:
Учебная комната

Рекомендуемая литература:
Конспект лекций.
Методики клинических лабораторных исследований. Справочное пособие. В 3-х т. Под ред. В.В. Меньшикова. – М., Лабора. 2008. – 448 с.
Методы клинических лабораторных исследований / под ред. проф. В.С. Камышникова. – 4-е изд. – М. : МЕДпресс-информ, 2011. – 752 с. :ил.

Самостоятельная практическая работа.
Задание №1. Изучить устройство камеры Горяева и правила работы с ней.
Камера Горяева – оптическое устройство для подсчета клеток или иных соизмеримых с ними частиц в заданном объеме жидкости. Состоит из толстого предметного стекла, имеющего прямоугольное углубление (камеру) с нанесенной микроскопической сеткой и тонкого покровного стекла. Камера разработана профессором Казанского университета Горяевым Н.К.
ТЕХНИЧЕСКИЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ КАМЕР ГОРЯЕВА И ФУКСА-РОЗЕНТАЛЯ:
Наименование
Камера Горяева
Камера Фукс-Розенталя

Сторона малого квадрата, mm
0.05 (0.001)
0.25 (0.001)

Сторона большого квадрата, mm
0.2 (0.0015)
1.0 (0.0015)

Сторона сетки, mm
3 (0.003)
4 (0.003)

Глубина камеры, mm
0.1 (0.003)
0.2 (0.005)

Площадь сетки, mm(кв)
9
16

Объём камеры, mm(куб)
0.9
3.2

Масса камеры, кг
0.04
0.04

Средний срок службы изделия, лет
6
6

 



Описание сетки камеры Горяева
Сетка камеры Горяева состоит из 225 больших квадратов, из которых 25 разделены на 16 малых квадратов.
[ Cкачайте файл, чтобы посмотреть картинку ] Рис 1. Сетка камеры Горяева
[ Cкачайте файл, чтобы посмотреть картинку ] Рис 2. Большой (1) и малый (2) квадраты сетки камеры Горяева
 [ Cкачайте файл, чтобы посмотреть картинку ] Рис 3. 225 больших квадратов сетки камеры Горяева
 
[ Cкачайте файл, чтобы посмотреть картинку ] Рис 4. 100 больших квадратов сетки камеры Горяева
 [ Cкачайте файл, чтобы посмотреть картинку ] Рис 5. Большой квадрат камеры Горяева разделенный на 16 малых квадратов.
Обслуживание камеры Горяева
Между работой камера должна храниться в сухом месте. После работы камера дезинфицируется погружением на 30 минут в 70% раствор этилового спирта, или на 60 минут в 4% раствор формалина, после чего камера промывается дистиллированной водой и протирается мягкой салфеткой.
 Правило подсчета клеток в квадрате (правило Егорова)
[ Cкачайте файл, чтобы посмотреть картинку ] В квадрате считаются клетки, лежащие внутри его, а также касающиеся левой и верхней границ. Клетки, касающиеся правой и нижней границ при подсчете не учитываются.
Задание №2. Подготовить рабочее место для забора крови. (см. Занятие №1)
Задание №3. Заполнить камеру Горяева.
Перед заполнением кровью счетную камеру и покровное стекло тщательно протирают и высушивают. Мякотью больших пальцев покровное стекло плотно прижимают к боковым пластинам камеры и слегка передвигают его вверх и вниз до тех пор, пока не появятся радужные полосы (“ньютоновые кольца”). Только в этом случае соблюдается должный объем камеры. Перед заполнением камеры взвесью крови в изотоническом растворе, содержимое пробирки несколько раз встряхивают. Пипеткой набирают небольшой объем взвеси крови и выпускают 1–2 капли на фильтровальную бумагу. После этого подносят каплю разведенной крови к краю покровного стекла, следя за тем, чтобы кровь равномерно заполняла всю поверхность камеры с сеткой, не затекая в боковые бороздки. Если это случится, взвесь крови удаляют фильтровальной бумагой.

рис. 2. заполнение кровью камеры Горяева.
После заполнения камеры ее оставляют на 1–2 минуты в горизонтальном положении для оседания эритроцитов.
Задание №4. Произведите подсчет эритроцитов.
Подсчет эритроцитов проводят при малом увеличении микроскопа (например, объектив 8x, окуляр 10x), в несколько затемненном поле зрения (при прикрытой диафрагме и опущенном конденсоре).

рис.3. Установка камеры Горяева по малое увеличение микроскопа.
Эритроциты подсчитывают в 5 расположенных по диагонали сетки квадратах, разделенных на малые, т. е. в 80 малых квадратах. Для этого под микроскопом находят верхний левый квадрат сетки (разделенный на 16 малых) и подсчитывают число эритроцитов в нем. При этом целесообразно придерживаться определенной последовательности подсчета эритроцитов: передвигаться из одного малого квадрата в другой по горизонтали, например, один ряд справа налево, другой ряд слева направо и т. д.
В каждом малом квадрате подсчитывают эритроциты, находящиеся внутри него, а также расположенные, например, на левой и верхней границе квадрата, пропуская эритроциты, лежащие на нижней и правой границе. Это позволяет добиться того, чтобы форменные элементы, расположенные на границе квадратов, не попали в счет дважды.

рис. 4. последовательность подсчета эритроцитов в камере Горяева.
Задание №5. Сделайте расчет эритроцитов.
Количество эритроцитов в 1 мкл (1 мм3) крови рассчитывают по следующей формуле:
13 EMBED Equation.3 1415
Где:
Х число эритроцитов в 1 мкл крови,
а число сосчитанных эритроцитов,
b объем малого квадрата (2,5x10-4 мкл),
200 разведение крови,
80 число малых квадратов, в которых производился счет. Введя в эту формулу значение объема одного малого квадрата сетки Горяева, получим упрощенную формулу:
[ Cкачайте файл, чтобы посмотреть картинку ]

Количество эритроцитов в 1 мкл (Х) равно числу форменных элементов крови, подсчитанных в 80 малых квадратах, умноженному на 104:
[ Cкачайте файл, чтобы посмотреть картинку ]

Например, в 5 больших квадратах (80 малых) сосчитано 456 эритроцитов. Тогда количество эритроцитов в 1 мкл составит 4 560 000, или примерно 4,5x106/мкл. Учитывая, что в 1 л жидкости содержится 106 мкл, число подсчитанных эритроцитов можно выразить следующим образом: 4,5x1012/л. Это последнее обозначение числа форменных элементов является в последние годы общепринятым.
Закрепление материала.
Задание №6. для контроля усвоения знаний решите задачи и ответьте на вопросы тестового контроля.
Решите задачу:
В пяти больших квадратах камеры Горяева было подсчитано 329 эритроцитов. Проведите расчет, и ответьте, сколько эритроцитов содержится в 1 мкл.
Решите задачу:
В пяти больших квадратах камеры Горяева было подсчитано 59 эритроцитов. Проведите расчет, и ответьте, сколько эритроцитов содержится в 1 мкл.
Тестовый контроль знаний
1. Норма эритроцитов для женщин:
а) 4,0x1012/л–5,5x1012/л
б) 3,5x1012/л– 5,0x1012/л.
в) 3,7x1012/л– 4,7x1012/л.
г) 4,5x1012/л– 5,0x1012/л.
2. Реактив, который используют для подсчета эритроцитов:
а) изотонический раствор
б) дистиллированная вода
в) 0,9% раствор NaCl
г) 3% раствор уксусной кислоты
3. Норма эритроцитов для мужчин:
а) 4,0x1012/л–5,5x1012/л
б) 3,5x1012/л– 5,0x1012/л.
в) 3,5x1012/л– 4,0x1012/л.
г) 4,5x1012/л– 5,0x1012/л.
4. назовите правильное соотношение изотонического раствора и крови для подсчета эритроцитов для определения гемоглобина и крови:
а) 5 мл раствора и 20 мкл крови
б) 4 мл раствора и 20 мкл крови
в) 5 мл раствора и 0,2 мл крови
г) 4 мл раствора и 0,2 мл крови
5. Эритроциты подсчитываются в камере Горяева:
а) в 25 больших квадратах
б) в 150 больших квадратах
в) в 100 больших квадратах
г) в 5 больших квадратах по диагоналям
6. Формула для подсчета эритроцитов в камере Горяева:
а) а х 104
б) а х 105
в) а х 1012
г) а х 109
7. Абсолютный эритроцитоз наблюдается при:
а) болезни Вакеза
б) мегалобластной анемии
в) лимфоме
г) гемодилюции
Развитием относительного эритроцитоза сопровождаются:
а) мегалобластная анемия
б) гемоконцентрация
в) гемодилюция
г) болезнь Вакеза

Домашнее задание:
Литература
Основная:
конспект занятия;
Методы клинических лабораторных исследований / под ред. проф. В.С. Камышникова. – 4-е изд. – М. : МЕДпресс-информ, 2011. – 752 с. :ил. (Стр. 342-344).
Дополнительная:
Кишкун А.А. «Руководство по лабораторным методам диагностики», Москва, «ГЕОТАР –МЕДИА, 2007г.

Вопросы для самоподготовки:
Устройство камеры Горяева.
Нормальные величины эритроцитов. Возрастные особенности.
Преаналитическая фаза. Факторы, влияющие на результат.
Техника выполнения подсчета эритроцитов в камере Горяева.
Клинико-диагностическое значение подсчета эритроцитов.











13PAGE 15


13PAGE 14215




Сетка камеры Горяева

Приложенные файлы


Добавить комментарий